器官型切片培養（organotypic slice cultures, OSCs）被廣泛用於在具有功能性和發育性組織背景的條件下研究細胞特性。隨着近年來轉基因小鼠品系和病毒工具的出現，我們提出，OSCs 可能使研究發育過程以及穩態和病理條件下多細胞膠質細胞及神經膠質相互作用成為可能。在本研究中，我們製備了小鼠皮層 OSCs，並在體外培養第 1 至 28 天（days in vitro, DIV）期間，使用少突膠質細胞、小膠質細胞狀態及神經元類型的標記物進行分析。
該 OSC 表現出類似體內的皮層分層結構，包括第 5 層錐體神經元，併產生高度穩健的同步週期性爆發活動，類似於 Up 狀態和 Down 狀態。膠質細胞顯示出顯著依賴於皮層層次和時間的發育模式：在第一週（DIV 1–7），切片相關碎片清除以及發育階段受限的稀疏少突膠質細胞髓鞘形成，共同造成了一種具有高度吞噬性、非穩態小膠質細胞的環境（分別通過 CD68 和嘌呤能受體 P2Y12 進行評估）。
然而，在 DIV 14 至 21 之間，切片顯示出典型的皮層髓鞘模式，並出現了穩態小膠質細胞表型，同時仍持續表現吞噬作用。此外，活體雙光子成像和形態計量分析顯示，小膠質細胞具有高度分支化形態，而有髓軸突表現出緻密髓鞘化，其髓鞘板層數量超過與其年齡匹配的體內軸突。最後，從 DIV 28 起及之後，髓鞘完整性開始受損，並與具有吞噬性的小膠質細胞相關。
綜上所述，結果表明，在 DIV 14 至 21 期間，皮層 OSCs 非常適合用於穩態及活動依賴性神經元-膠質細胞相互作用的活體成像研究，從而彌合了體內研究與原代細胞培養之間的差距。
📄 原文連結：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.15.725074v1?rss=1
🏷️ 器官型切片培養 新皮層 神經膠質相互作用 小膠質細胞 少突膠質細胞 雙光子成像