利用异种体细胞核移植由恒河猴(Macaca mulatta)成年成纤维细胞获得的囊胚

在非人灵长类动物中,通过体细胞核移植(SCNT)生产同源胚胎时,难以获取足够数量的卵母细胞。由于这一因素,使用异种卵母细胞的种间体细胞核移植(iSCNT)是一种具有吸引力的替代方法。本研究的目标是利用去核奶牛(Bos taurus)减数第二次分裂中期卵母细胞和成年恒河猴(Macaca mulatta)成纤维细胞,生产来源于iSCNT的囊胚。 通过活检采集了一只6岁雄性恒河猴的耳部皮肤组织,并分离...
其他

在非人灵长类动物中,通过体细胞核移植(SCNT)生产同源胚胎时,难以获取足够数量的卵母细胞。由于这一因素,使用异种卵母细胞的种间体细胞核移植(iSCNT)是一种具有吸引力的替代方法。本研究的目标是利用去核奶牛(Bos taurus)减数第二次分裂中期卵母细胞和成年恒河猴(Macaca mulatta)成纤维细胞,生产来源于iSCNT的囊胚。

通过活检采集了一只6岁雄性恒河猴的耳部皮肤组织,并分离获得成纤维细胞。采集奶牛卵巢中的未成熟卵丘-卵母细胞复合体,并在Medium 199中进行体外成熟培养。将去核卵母细胞与恒河猴成纤维细胞重构后,在改良合成输卵管液中培养iSCNT胚胎,并在含5–5.5% CO2、不同条件(37–39 °C和5–20% O2)的环境下培养,以考察体外培养条件的影响。大多数胚胎停滞于8细胞期或16细胞期,在总计1153枚经激活并培养的胚胎中,仅通过iSCNT获得了3枚囊胚(生产率为0.26%)。

其中两枚囊胚采用双苯并咪唑染色法进行细胞核数目计数,结果分别为51个和24个。另一枚来源于iSCNT的囊胚用于通过PCR分析线粒体DNA(mtDNA),结果检测到恒河猴和奶牛两者的mtDNA。尽管发育率极低,本研究证实,利用两个系统发育上相距较远的物种(其中包括一种灵长类动物)进行iSCNT可以产生囊胚。随着发育率的进一步提高,未来有可能建立恒河猴来源的iSCNT胚胎干细胞系,用于研究灵长类细胞核与奶牛线粒体之间的相互作用机制。


Administrator 2026年5月18日
我们的博客
存档