其他
在孵化后的哺乳动物胚胎存活支持方面的尝试仅取得了有限成功,尽管一些小鼠研究报道了胚胎在着床后阶段的生长。本研究的目的是建立并表征一种体外培养体系,以支持牛胚胎的延长生长与分化。取自屠宰场的卵母细胞经体外成熟和受精处理。推定合子在补充5%牛血清(CS)的改良合成输卵管液(SOFaaci)培养基中培养。第9天时,将单个孵化后的囊胚(n = 160)随机分配至分别补充5%牛血清白蛋白、5% CS、5%胎牛血清(FCS)或仅含SOF的SOFaaci培养基中,并置于胶原凝胶基质上培养,最长达45天。
在不同时间点评估胚胎,直至其完全解聚或胚胎细胞完全消失。
孵化后囊胚在无蛋白SOFaaci培养基中的活力受到严重损害。与其他组相比,添加FCS可在最长时间段内(第45天)促进胚胎生长增加。通过实体显微镜观察到胚胎细胞的长期存活,其表现为三维管状结构的增殖与发育,并在培养中达到85%汇合度。对所有处理组获得的形态结构进行苏木精-伊红染色显示,胚胎在不同程度上表现出滋养层、内细胞团和下胚层的发育。无论采用何种处理,延长体外培养均未导致与体内胚胎所描述情况相当的发育。然而,在本研究中,已有证据表明牛胚胎实现了超出以往水平的延长培养。
不过,仍需进一步研究以明确牛胚胎延长体外培养的确切需求。