器官型切片培养（organotypic slice cultures, OSCs）被广泛用于在具有功能性和发育性组织背景的条件下研究细胞特性。随着近年来转基因小鼠品系和病毒工具的出现，我们提出，OSCs 可能使研究发育过程以及稳态和病理条件下多细胞胶质细胞及神经胶质相互作用成为可能。在本研究中，我们制备了小鼠皮层 OSCs，并在体外培养第 1 至 28 天（days in vitro, DIV）期间，使用少突胶质细胞、小胶质细胞状态及神经元类型的标记物进行分析。
该 OSC 表现出类似体内的皮层分层结构，包括第 5 层锥体神经元，并产生高度稳健的同步周期性爆发活动，类似于 Up 状态和 Down 状态。胶质细胞显示出显著依赖于皮层层次和时间的发育模式：在第一周（DIV 1–7），切片相关碎片清除以及发育阶段受限的稀疏少突胶质细胞髓鞘形成，共同造成了一种具有高度吞噬性、非稳态小胶质细胞的环境（分别通过 CD68 和嘌呤能受体 P2Y12 进行评估）。
然而，在 DIV 14 至 21 之间，切片显示出典型的皮层髓鞘模式，并出现了稳态小胶质细胞表型，同时仍持续表现吞噬作用。此外，活体双光子成像和形态计量分析显示，小胶质细胞具有高度分支化形态，而有髓轴突表现出致密髓鞘化，其髓鞘板层数量超过与其年龄匹配的体内轴突。最后，从 DIV 28 起及之后，髓鞘完整性开始受损，并与具有吞噬性的小胶质细胞相关。
综上所述，结果表明，在 DIV 14 至 21 期间，皮层 OSCs 非常适合用于稳态及活动依赖性神经元-胶质细胞相互作用的活体成像研究，从而弥合了体内研究与原代细胞培养之间的差距。
📄 原文链接：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.15.725074v1?rss=1
🏷️ 器官型切片培养 新皮层 神经胶质相互作用 小胶质细胞 少突胶质细胞 双光子成像