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在非人靈長類動物中,通過體細胞核移植(SCNT)生產同源胚胎時,難以取得足夠數量的卵母細胞。由於這一因素,使用異種卵母細胞的種間體細胞核移植(iSCNT)是一種具有吸引力的替代方法。本研究的目標是利用去核奶牛(Bos taurus)減數第二次分裂中期卵母細胞和成年恆河猴(Macaca mulatta)成纖維細胞,生產來源於iSCNT的囊胚。
通過活檢採集了一隻6歲雄性恆河猴的耳部皮膚組織,並分離獲得成纖維細胞。採集奶牛卵巢中的未成熟卵丘-卵母細胞複合體,並在Medium 199中進行體外成熟培養。將去核卵母細胞與恆河猴成纖維細胞重構後,在改良合成輸卵管液中培養iSCNT胚胎,並在含5–5.5% CO2、不同條件(37–39 °C和5–20% O2)的環境下培養,以考察體外培養條件的影響。大多數胚胎停滯於8細胞期或16細胞期,在總計1153枚經啟用並培養的胚胎中,僅通過iSCNT獲得了3枚囊胚(生產率為0.26%)。
其中兩枚囊胚採用雙苯並咪唑染色法進行細胞核數目計數,結果分別為51個和24個。另一枚來源於iSCNT的囊胚用於通過PCR分析線粒體DNA(mtDNA),結果檢測到恆河猴和奶牛兩者的mtDNA。儘管發育率極低,本研究證實,利用兩個系統發育上相距較遠的物種(其中包括一種靈長類動物)進行iSCNT可以產生囊胚。隨着發育率的進一步提高,未來有可能建立恆河猴來源的iSCNT胚胎幹細胞系,用於研究靈長類細胞核與奶牛線粒體之間的相互作用機制。