- 恆溫箱內的可插拔單軸迴轉器可裝載 20 個薄壁玻璃培養瓶。迴轉器旋轉的同時,經加濕的 O₂/N₂/CO₂ 混合氣體通過其內部氣路,直接、連續地送入每個培養瓶。
- 這種連續通氣的迴轉器培養法是器官發生期胚胎培養的經典方法:已發表的方案中,大鼠胚胎自妊娠第 9.5 天起可培養約 96 小時,自第 11.5 天起可培養 72 小時(Osumi-Yamashita 等,1997)。
- 氣體比例、流量、正壓、溫度和轉速均可數字化設定。至少 10 組參數可按時間軸自動切換,分階段換氣不再依賴人工重新充氣。
- 適用於胚胎操作與發育生物學實驗、哺乳動物胚胎代謝研究、藥物與化學品的胚胎毒性及致畸性試驗,以及幹細胞衍生胚胎模型的長時程動態培養。
示例圖片拍攝自用戶實驗室對小鼠全胚胎或幹細胞衍生胚胎模型的初步培養。左:培養瓶內樣本(EmbryoLive20);中:胚胎;右:卵黃囊,標尺 200 μm。其他樣本的結果以實際實驗為準。
代表性培養方案
以下為著床後大鼠胚胎(Sprague-Dawley)的培養方案,整理自 Osumi-Yamashita 等(1997)的表 1,其數據採用連續通氣迴轉器系統獲得,可作為實驗設計的起點。
| 取胚時間(妊娠天數)a | 初始體節數 | 每胚培養液量(ml)b | O₂ 濃度隨時間變化c | 培養時長 | 最終體節數 |
|---|---|---|---|---|---|
| 9.5 | 0 | 1 | 5% (0 h–) → 20% (36 h–) → 60% (48 h–) → 95% (60 h–) 72 h 時 OYS | 96 h | 40+ |
| 10.5 | ~10 | 1.5–2 | 5% (0 h–) → 20% (12 h–) → 60% (24 h–) → 95% (36 h–) 48 h 時 OYS | 72 h | 40+ |
| 11.5 | 22 | 2.5–3 48 h 時 MC | 95% 24 h 時 OYS | 72 h | ~50d |
| 12.5 (OYS) | 34 | 3e 24–36 h 時 MC | 95% | 60 h | ~50d |
- 基於原作者使用 Sprague-Dawley 大鼠胚胎及連續通氣迴轉式全胚胎培養裝置獲得的數據。
- 培養液:含 2 mg/ml 葡萄糖的 100% 大鼠血清;原研究中每瓶至少 2 ml。
- 混合氣體含 5% CO₂,其餘為 N₂。換氣時間可提前或推遲至多 3 h,但高濃度氧對神經管閉合前的胚胎有毒性。
- 由於尾部退化,尾部體節不再增加。
- 更換為以 Tyrode 液稀釋 2–3 倍的血清。
OYS:打開卵黃囊膜;MC:更換培養液。原作者指出,該方案同樣適用於相同發育階段的小鼠胚胎,所需氧濃度更低、培養液更少;小鼠胚胎的發育略遜於大鼠胚胎,可能與血清來自不同物種有關。
在 WEC001 上運行分階段方案
將每個階段的 O₂/N₂/CO₂ 比例、流量、壓力和轉速保存為一組參數(至少可設 10 組)。主機按預定時間自動切換參數組,並記錄實際運行值,便於事後回看。
本表摘錄已發表的方案,僅供參考,相關數據並非使用 WEC001 獲得。請根據品系、胚齡和實驗目標優化條件。涉及高氧階段時,請與我們的技術團隊確認氣源配置和實驗室安全要求。
旋轉式全胚胎培養裝置 WEC001-GT6 Discovery · 配自轉灌流模組
GT6 Discovery 在 GT5 標準配置(20 瓶位迴轉器)的基礎上,增加獨立保壓的單瓶自轉灌流模組 SunKP1,可連續加液、換液、加藥和清洗;同時配備培養液與緩衝液用製冷加熱模組,以及至少 2 套攝像模組,適合培養過程中需要換液、加藥或灌流的實驗。
技術參數
| 項目 | WEC001-GT5(標準型) | WEC001-GT6 Discovery |
|---|---|---|
| 20 瓶位迴轉器 | DishKP5 可插拔單軸迴轉器;航空鋁合金,抗菌塗層;兩側瓶位帶數字編號;單瓶插拔不改變系統壓力 | |
| 自轉灌流模組 | 不含;主機支援後續加裝模組 | SunKP1 ×1:獨立保壓,1 個瓶位;多通道自動換液、加液、加藥與清洗;製冷加熱模組;攝像 |
| 培養瓶 | BottleKP2 薄壁玻璃卡口培養瓶 ×60;壁厚 1 mm,底厚 0.5 mm;耐壓 ≥0.21 MPa;最大有效培養體積 9 ml(15 ml 可選) | BottleKP2 ×60;壁厚 1 mm,底厚 0.5 mm;耐壓 ≥0.21 MPa;最大有效培養體積 9 ml |
| 轉速 | 0–60 RPM,步進 0.1 RPM(顯示精度 ±0.01 RPM);可正轉、反轉、暫停 | |
| 溫度 | 10–50℃;37℃穩定性 ±0.1℃ | 10–50℃;37℃穩定性 ±0.1℃;另配培養液與緩衝液製冷加熱 |
| 壓力 | 0.0–20.0 PSI,調節步進 0.1 PSI;分辨率 0.001 PSI;脈動壓差可調 | |
| 配氣 | O₂ / N₂ / CO₂ 各 0–100%(合計 100%),步進 0.1%;支援 %wt 與 %vol 兩種模式;兼容 40% 或 99.99% 氧氣源;一鍵 AI 自動校準;附氣體淨化過濾瓶 | |
| 氣體監測 | 光學傳感器,即時顯示;O₂ 與 CO₂ 量程 0–100%vol;實測穩定性 CO₂ ±0.1%vol、O₂ ±0.3%vol | |
| 氣體流量 | 8–100 ml/min,即時顯示;精度 ±0.01 ml/min | |
| 程序與曲線 | 至少 10 組參數(氣體比例、壓力、轉速等)按時間軸自動執行;關鍵參數即時曲線 | |
| 成像與遙距訪問 | EmbryoLive20 高清攝像與通訊模組;可觀察至少 10 個培養瓶;手機或電腦即時查看並修改參數;延時攝影 | 至少 2 套高清攝像模組;可觀察至少 11 個培養瓶;延時攝影與錄像 |
| 培養日誌 | 至少 10 萬條記錄,含時間、氣體濃度、流量、溫度、壓力和照片;可匯出 Excel 或 ZIP | |
| 安全保護 | 雙重泄壓保護;箱內氧氣泄漏報警,閾值 20–40% 可調 | |
| 操作 | ≥14 英寸高清觸控屏幕,可戴手套操作;Linux 操作系統 | |
| 內置輔助裝置 | 加濕瓶、氣泡觀察瓶、3 個標準進氣接口、1 個排氣接口、USB 接口、照明燈、UV 消毒燈、帶孔擱板 | |
| 電源 | 220 VAC ±10%, 50/60 Hz | |
| 使用環境 | 15–37℃;相對濕度 <80% | |
| 整機尺寸與重量 | 一體機;不大於 78 × 70 × 165 cm(長 × 寬 × 高);重量不大於 120 kg | |
| 價格 | 按配置報價,歡迎諮詢。 | |
以上規格依據 GT5 / GT6 技術參數表,描述的是儀器的工作範圍,並非經驗證的培養方案。交付配置以雙方確認的技術協議為準。產品持續改進,細節如有變更,恕不另行通知。
培養器具與配件 旋轉式全胚胎培養裝置用
BottleKP2 壁厚 1 mm、底厚 0.5 mm,便於清晰觀察和延時拍攝。卡口設計取代螺口,無需用力擰緊即可快速裝卸。
有效培養體積可選 2 / 4 / 7 / 9 ml(15 ml 為選配),便於按胚胎數量和發育階段匹配培養液量。矽膠墊和金屬蓋可 121℃ 高壓滅菌。
標準配置
| 編號 | 名稱與規格 | GT5 標配數量 | GT6 Discovery 標配數量 |
|---|---|---|---|
| GT02-7 | DishKP5 可插拔單軸迴轉器(公轉版),保壓,20 個瓶位 | 1 | 1 |
| GT03-ZZ-1 | SunKP1 可插拔單軸迴轉器(自轉版),獨立保壓,1 個瓶位;含自轉灌流、製冷加熱和攝像模組 | – | 1 套 |
| GT03-7-1 | BottleKP2 薄壁玻璃卡口培養瓶;壁厚 1 mm,底厚 0.5 mm;最大 0.21 MPa | 60 | 60 |
| GT03-7-2 | 環形密封矽膠墊,可 121℃ 高壓滅菌 | 60 | 120 |
| GT03-7-3B | 環形密封金屬蓋(藍色),可 121℃ 高壓滅菌 | 200 | 120 |
| GT03-7-3G | 環形密封金屬蓋(綠色),可 121℃ 高壓滅菌 | 200 | 120 |
| GT03-7-4 | 金屬壓蓋器 | 1 | 1 |
| GT03-7-5 | 起蓋器 | 1 | 1 |
| 1856710 | TeslaGrip 特斯拉抓手(Adawarbler 專用) | 1 | 1 |
| GT08 | 防塵塞 | 20 | 20 |
另附維修工具、φ6 mm 排氣管、O 型圈及氣路用迷你扳手。培養瓶、矽膠墊和金屬蓋可單獨訂購,也可按需定製更大容積的培養瓶。價格請諮詢。
需實驗室自備:O₂、N₂、CO₂ 氣瓶或中央供氣(O₂ 可用 40% O₂ / 60% N₂ 混合氣代替),以及 3 個雙級減壓閥(量程 0–0.6 MPa,出口接 6 mm 外徑軟管,快插或快擰接頭)。
旋轉培養法的沿革
離體齧齒類胚胎的旋轉培養由 D.A.T. New 等人於 20 世紀 70 年代初建立。1979 年,New 與 Cockroft 報道了連續更新氣相的旋轉培養瓶法;此後,日本研究者針對器官發生期胚胎改進了這一迴轉器系統,並將其用於顱面發育與神經嵴遷移研究。
WEC001 沿用培養瓶裝載於迴轉器上的 BTC(British Turntable Culture)原理,以三氣、壓力、溫度和轉速的數字化控制取代人工換氣,並記錄每一次培養運行。
參考文獻
- New DAT, Cockroft DL. A rotating bottle culture method with continuous replacement of the gas phase. Experientia. 1979;35(1):138–140. doi:10.1007/BF01917926
- New DAT, Coppola PT, Terry S. Culture of explanted rat embryos in rotating tubes. J Reprod Fertil. 1973;35(1):135–138.
- Eto K, Osumi-Yamashita N. Whole embryo culture and the study of postimplantation mammalian development. Dev Growth Differ. 1995;37(2):123–132.
- Osumi-Yamashita N, Ninomiya Y, Eto K. Mammalian craniofacial embryology in vitro. Int J Dev Biol. 1997;41(2):187–194. PubMed 9184325
以上文獻僅作為方法學背景引用,相關研究並未使用或驗證 WEC001。
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