生物化學
藍藻天然產物是生物活性化合物的重要來源,但其異源生產仍然面臨挑戰。本研究考察了在真菌宿主中表達 lyngbyatoxin A(LTXA)生物合成基因簇的可行性。lyngbyatoxin 生物合成基因(ltxA、ltxB、ltxC)分別被克隆並在米麴黴 Aspergillus oryzae NSAR1 中於誘導型啟動子的控制下表達。採用 LCMS 評估代謝產物生成情況,並通過 RTPCR 進行轉錄分析。研究使用了密碼子優化構建體和前體補料實驗以評估通路功能性。
儘管已確認 ltxB 和 ltxC 的轉錄,但在 ltxAC 共表達條件下未檢測到 LTXA 或通路中間體的生成。RTPCR 分析顯示 ltxA 轉錄本發生截短,提示其與真菌的轉錄機制或剪接機制不兼容。相比之下,表達密碼子優化的 ltxC 使吲哚內酰胺 V 在 A. oryzae 中能夠生物轉化為 LTXA,證實了該異戊烯基轉移酶的功能性表達。這些結果表明,轉錄層面的限制是真菌宿主中異源表達藍藻 NRPS 通路的關鍵障礙,同時也顯示下游修飾酶仍可保持功能。
本研究為未來利用真菌平台開展藍藻天然產物生物合成工程提供了見解。
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📄 原文連結:https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.15.725566v1?rss=1
🏷️ 異源表達 米麴黴 藍藻天然產物 生物合成基因簇 轉錄障礙 生物轉化