細胞生物學
理解骨骼肌代謝需要對關鍵細胞參數進行即時監測，例如鈣離子（Ca2+）、三磷酸腺苷（ATP）、環磷酸腺苷（cAMP）以及細胞內溫度。基於熒光蛋白（FP）的生物傳感器被用於這些信號的活細胞成像，並具有較高的時空分辨率。分化後的肌管是用於生理性肌肉代謝研究的體外模型。然而，將基於FP的生物傳感器高效轉染至這些細胞中仍具有挑戰性。在此，我們開發了一種基於電穿孔的策略，用於將重組蛋白生物傳感器遞送至完全分化的肌管中。
針對Ca2+、ATP、cAMP和溫度的生物傳感器通過大腸桿菌進行重組生產，並採用電穿孔導入肌管。對電穿孔條件進行了優化，以最大限度提高遞送效率、保持細胞活力並儘量減少細胞損傷。我們建立了一種穩健的細胞內遞送系統，能夠有效展示Ca2+、ATP和溫度的動態變化。此外，我們還成功實現了兩種生物傳感器的共遞送，從而實現了對刺激響應過程中Ca2+和cAMP的雙重成像。
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📄 原文連結：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.11.722572v1?rss=1
🏷️ 電穿孔 蛋白質生物傳感器 肌管 代謝成像 活細胞成像 雙重成像