利用異種體細胞核移植技術由恆河猴(Macaca mulatta)成年成纖維細胞獲得的囊胚

在非人靈長類動物中,通過體細胞核移植(SCNT)生產同源胚胎所需的足夠數量卵母細胞難以獲得。基於這一因素,利用異種卵母細胞進行種間體細胞核移植(iSCNT)是一種具有吸引力的替代方法。本研究的目的是使用去核牛(Bos taurus)減數分裂中期II(MII)卵母細胞和成年恆河猴(Macaca mulatta)成纖維細胞生產來源於iSCNT的囊胚。 通過活檢採集一隻6歲雄性恆河猴的耳部皮膚組織,並...
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在非人靈長類動物中,通過體細胞核移植(SCNT)生產同源胚胎所需的足夠數量卵母細胞難以獲得。基於這一因素,利用異種卵母細胞進行種間體細胞核移植(iSCNT)是一種具有吸引力的替代方法。本研究的目的是使用去核牛(Bos taurus)減數分裂中期II(MII)卵母細胞和成年恆河猴(Macaca mulatta)成纖維細胞生產來源於iSCNT的囊胚。

通過活檢採集一隻6歲雄性恆河猴的耳部皮膚組織,並分離成纖維細胞。從牛卵巢中採集未成熟的卵丘-卵母細胞複合體,並在Medium 199中進行體外成熟。將去核卵母細胞與恆河猴成纖維細胞重構,並在改良合成輸卵管液中培養iSCNT胚胎,在含5–5.5% CO2的氣體環境下,於不同條件(37–39 °C和5–20% O2)培養,以考察體外培養條件的影響。

大多數胚胎發育停滯於8細胞期或16細胞期,在總計1153枚經培養的啟用胚胎中,僅通過iSCNT獲得了3枚囊胚(生產率為0.26%)。其中兩枚囊胚採用雙苯並咪唑染色法用於核數計數,結果分別為51和24。另一枚來源於iSCNT的囊胚用於通過PCR分析線粒體DNA(mtDNA),結果檢測到恆河猴和牛兩者的mtDNA。

儘管發育率極低,本研究證實,採用兩個系統發育關係較遠的物種(其中包括靈長類)進行iSCNT可以產生囊胚。隨着發育率的提高,未來有可能建立來源於恆河猴iSCNT的胚胎幹細胞系,用於研究靈長類細胞核與牛線粒體之間相互作用機制。


Administrator 2026年5月18日
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