放射治療（radiotherapy，RT）的抗癌療效受獲得性放射抗性（radioresistance，RR）的限制。本研究旨在表徵乳腺癌細胞對大分割照射（hypofractionated irradiation，hFI）的長期應答。為此，我們採用一種具有臨床導向的 hFI 方案（累積劑量 56 Gy）對小鼠乳腺 4T1 腫瘤細胞（4T1WT）進行處理，以在體外篩選獲得放射抗性細胞（4T1RS）。
此外，對皮下生長的 4T1CTR 腫瘤實施 hFI（累積劑量 24 Gy），從而在體內篩選獲得 4T1IR 細胞。體外單次照射後，與親本 4T1WT 細胞相比，經放射篩選的 4T1RS 細胞表現出更高的增殖能力、減弱的 G2/M 期阻滯以及降低的凋亡水平。此外，4T1RS 細胞顯示出更高的 DNA 損傷應答（DNA-damage response，DDR）相關蛋白（pKAP1、pCHK2、γH2AX）表達，並且核內 γH2AX 焦點分析表明其雙鏈斷裂（DSB）修復效率得到改善。
體外條件下，兩種細胞變體在調控細胞週期進程、DDR、凋亡及氧化應激的因子的 mRNA 表達方面存在顯著差異。對體內生長腫瘤進行 hFI 後第 10 天，與未照射的 4T1CTR 對照腫瘤相比，經放射篩選的 4T1IR 腫瘤中殘餘 DNA 損傷和凋亡增加，而增殖降低。無論是照射還是未照射腫瘤，在易感性相關基因和轉移相關基因的 mRNA 表達譜方面均顯示出複雜差異，前者包括 GADD45a、DUSP1、CDKN1a 和 NQO1，後者包括 CD44 及 Rho 相關因子。
此外，hFI 促進了 MPO 陽性免疫細胞向腫瘤組織的浸潤，而腫瘤區域內 CD3 陽性細胞的存在減少。另外，體內 hFI 還導致多種免疫細胞標誌物、Rho 調控因子、組織重塑分子及細胞黏附因子的 mRNA 表達失調。總之，我們鑑定出體外和體內 hFI 後持續存在的適應性變化，這些變化與 DNA 複製、DNA 修復、細胞衰老和凋亡，以及免疫細胞浸潤和組織重塑相關。
📄 原文連結：https://www.biorxiv.org/content/10.64898/2026.05.12.724504v1?rss=1
🏷️ 乳腺癌 放射抗性 低分割放療 DNA損傷應答 雙鏈斷裂修復