其他
在孵化後的哺乳動物胚胎存活支援方面的嘗試僅取得了有限成功,儘管一些小鼠研究報道了胚胎在著床後階段的生長。本研究的目的是建立並表徵一種體外培養體系,以支援牛胚胎的延長生長與分化。取自屠宰場的卵母細胞經體外成熟和受精處理。推定合子在補充5%牛血清(CS)的改良合成輸卵管液(SOFaaci)培養基中培養。第9天時,將單個孵化後的囊胚(n = 160)隨機分配至分別補充5%牛血清白蛋白、5% CS、5%胎牛血清(FCS)或僅含SOF的SOFaaci培養基中,並置於膠原凝膠基質上培養,最長達45天。
在不同時間點評估胚胎,直至其完全解聚或胚胎細胞完全消失。
孵化後囊胚在無蛋白SOFaaci培養基中的活力受到嚴重損害。與其他組相比,添加FCS可在最長時間段內(第45天)促進胚胎生長增加。通過實體顯微鏡觀察到胚胎細胞的長期存活,其表現為三維管狀結構的增殖與發育,並在培養中達到85%匯合度。對所有處理組獲得的形態結構進行蘇木精-伊紅染色顯示,胚胎在不同程度上表現出滋養層、內細胞團和下胚層的發育。無論採用何種處理,延長體外培養均未導致與體內胚胎所描述情況相當的發育。然而,在本研究中,已有證據表明牛胚胎實現了超出以往水平的延長培養。
不過,仍需進一步研究以明確牛胚胎延長體外培養的確切需求。